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解析醋酸菌培养基
查看:  发稿日期:2020-05-18 12:00
  醋酸菌斜面培养基:葡萄糖 1克,酵母膏1克,碳酸钙1克,琼脂2.5克,水100毫升。
  斜面培养斜面制作:培养基按配方调配好(碳酸钙先不加入),分装试管,灭菌备用。碳酸钙按比例分装、灭菌。摆斜面前将培养基和碳酸钙混合,用手搓均匀,然后摆斜面,备用。
  Acetobacter Medium (醋酸菌培养基
  葡萄糖
  酵母膏
  琼脂
  蒸馏水
  调
  适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种
  ⑴斜面培养基
  葡萄糖8g,酵母粉10g碳酸钙5g琼脂15~20g水1000mLpH5.5,分装试管。0.IMPa灭菌20min。95%酒精(食用级)40mL。摆斜面。
  ⑵液体增殖培养基
  葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL灭菌后加入酒精(食用级)40mL 0.1MPa灭菌20min。
  ⑶醋酸菌种的制备
  扩大培养过程:安瓿管,液体试管1.液体试管2,100mL三角瓶,500mL三角瓶,1000mL三角瓶,种子罐。
  ①安瓿管开启:酒精棉球擦抹三次,用重器撞击,打开,注入0.5mL无菌水,将菌球溶解,全部注入装有10mL液体培养基的18×180试管1内,30℃培养72h,每2h摇动—次。
  ②菌体生长:培养基变混浊后,颜色变浅,对光观察摇动时有云雾状金属光泽。每只装有10mL液体培养基的试管2接入lmL或0.5mL菌液,30℃培养48h,每2h摇动—次。
  ③三角瓶三级扩培,三角瓶中培养基的装量为50%,每级按种量在10%左右,在转换振荡器上恒温培养,培养温度均为30℃,时间依次缩短为36、36、24h。
  ④种子罐培养基同前 配料后种子罐夹套加热灭菌100℃保持15min,冷却后,先加入4%食用酒精,无菌操作接入菌种。接种量为10%~12%,温度保持在30℃±1℃,通无菌空气,菌体生长时间为24~36h.视菌体生长情况及镜检结果而定。
  ⑤每次接种前,先将菌种进行外观观察 。有异样情况者,作涂片、染色、镜检观察,菌体生长不正常或染菌的三角瓶不得使用。外观正常者抽检2—3个样品,在确保菌株纯度、无污染的情况下转入下一级菌种扩培。培养醋酸菌时,需要用含糖或酵母膏(维生素B)的培养基,在肉汤蛋白胨培养基上生长不良。大多数菌株可用六碳糖和甘油作为碳源,对甘露醇和葡萄糖酸盐很少能利用或不能利用,不分解乳糖、糊精和淀粉。醋酸菌不形成芽孢,一般为形态近于球菌的短杆菌。醋酸菌可在PH4.3以下繁殖,增殖时多在液面成膜。幼龄细胞呈G-,老龄细胞呈可变性,因而染色只用来作为鉴定时的参考因素。
  醋酸菌增殖时生成挥发性酸臭。感官判断类似于一种丁香成分,和纯醋酸的嗅感不同。防止方法不外呼改善工厂的环境卫生,加强卫生管理。
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