今天是:;欢迎进入上海光学仪器厂网站! 分站
产品分类
Product categories
上海光学仪器一厂西安分公司
地址:西安市莲湖区龙首北路宫园壹号2栋2单元3202室
电话:029-86746568
您当前的位置:主页 > 技术 >
原代细胞骨架的染色方法
查看:  发稿日期:2020-05-18 11:53
  原代细胞骨架的染色方法
  一、微丝的显示方法步骤:
  用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s;
  用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min;
  用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次,每次10min;
  PBS漂洗3次;
  用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽(phalloidin)(1:10)室温中反应15min;
  PBS漂洗3次;
  60%甘油+荧光防淬剂封片;
  荧光显微镜观察;
  二、微管的显示方法:
  用PBS液漂洗盖玻片的原代细胞3次,每次30s;
  在室温中用3%甲醛/PBS固定20min;
  用PBS液再漂洗3次,每次1min,最后用滤纸吸干多余的PBS液;
  投入冷丙酮中(-10—-20℃)7min;
  用PBS漂洗3次,每次1min,最后用滤纸吸干多余的PBS液;
  向直径6cm的干净碟皿中央滴一滴浓度为0.1—0.2mg/ml的一级抗微管蛋白抗体,令小盖片细胞面向下扣在抗体液上,覆以皿盖,于37℃温箱中放置45min—1h;
  向碟皿内匀速缓慢滴加PBS,令盖片浮起在液面,用镊子夹出,按步骤3处理;
  向干净碟皿中央滴一滴浓度为0.1—0.2mg/ml的荧光标记的二抗,其后操作按步骤6进行;
  按步骤7和3操作;
  滴pH8.5的90%的甘油/PBS少许于载玻片上,把小盖片的原代细胞面覆在大盖片上;
  将盖片置于荧光显微镜下观察;
分站:????东营 | 无锡 | 青岛 | 威海 | 珠海 | 苏州 | 重庆 | 天津 | 上海 | 北京 | 石家庄 | 太原 | 大连 | 宁波 | 厦门 | 金华 | 扬州 | 台州 | 淄博 | 嘉兴 | 徐州 | 潍坊 | 泉州 | 温州 | 唐山 | 绍兴 | 沈阳 | 长春 | 哈尔滨 | 兰州 | 乌鲁木齐 | 呼和浩特 | 西宁 | 深圳 | 东莞 | 烟台 | 南通 | 佛山 | 南京 | 拉萨 | 银川 | 南宁 | 昆明 | 杭州 | 合肥 | 南昌 | 福州 | 济南 | 郑州 | 长沙 | 广州 | 海口 | 武汉 | 贵阳 | 成都 |
原代细胞骨架的染色方法版权所有:上海光学仪器厂

网站备案号:沪ICP备15038489

在线客服
手机:18092687870
电话:029-86746568

扫码加微信
香蕉电影网香蕉在线